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浙江天科乳胶微球使用说明

我公司代理销售浙江天科高新技术发展有限公司的乳胶微球,可以提供粒径在60nm~1000nm 之间各种粒径和羧基含量在100μmol/g~1200μmol/g 的乳胶微球。微球的粒径分布指数均小于0.050。微球材质为聚苯乙烯或者聚甲基丙烯酸甲酯。也可以提供氨基的和表面无基团的乳胶微球。并会提供优质的售后服务和产品质量保证。

订购咨询热线:010-5701 7625/8690/8691136 4103 4192

产品优势:

• 多样化:可提供60nm~1000nm 之间各种粒径的微球;

• 良好的稳定性:产品批内、批间稳定,并且常温放置可达36 个月;

• 高度的均一性:PDI0.050

• 表面羧基含量高:羧基含量在100μmol/g~ 1200μmol/g

• 独特的制备工艺:羧基牢固,不易脱落;

• 产品中无聚丙烯酸类含羧基的游离聚合物存在;

• 微球的强度和韧性佳:在应用中不易被机械损坏;

产品描述:

此乳胶微球材质为聚苯乙烯高聚物。产品为水分散体系,有很好的耐溶剂、耐各种pH环境,以及表面富含羧基,可以适用于各种缓冲溶液。微球表面光滑、平整,比表面积大,并具有很好的均一性、单分散性和稳定性。

试剂准备:

MES缓冲液 500mMpH5-64℃储存;

EDAC1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亚胺盐酸盐) 配置浓度为52μmol/mL(称取10mg EDAC,加入1mL去离子水);

NHSN-羟基琥珀酰亚胺) 50mg/mL水溶液;

蛋白质溶液 蛋白质充分稀释溶解,浓度为110mg/mL

一步法偶联:

1. 将配好的溶液按以下顺序加入离心管中,放置在恒温摇床上,37℃,120rpm15min

① 加入50μL 500mM 储存缓冲液,再加水稀释至1mL

② 蛋白质溶液;

200μL 5%微球。

2. 根据计算量量取EDAC 溶液,快速倒入上述溶液中,混匀;

3. 放置在恒温摇床上,37℃,120rpm1h

4. 13000rpm离心30min,沉降后,弃上清,收集离心沉淀;用50mM MES 缓冲液洗涤3 次;离心沉降后,弃上清;

5. 加入0.97mL MES 缓冲液,将微球浓度调为1%,并重新悬浮;

6. 福林酚法测定偶联蛋白质含量(可选)。

7.重新悬浮后加入一定量的BSA溶液,保存。

二步法偶联:

1. 将配好的溶液按以下顺序滴加入离心管

100μL 500mM MES 缓冲液;

② 加水稀释至1mL

200μL 5%微球;

230uL NHS 溶液

EDAC 水溶液(计算量)

2. 放置在恒温摇床上,37℃,120rpm30min

3. 13000rpm离心30min,沉降后,弃上清,收集离心沉淀;用1mL 50mM MES 缓冲液洗涤2 次;离心沉降后,弃上清。

4. 将配好的溶液按以下顺序加入离心管中,混匀

100ul 500mM MES 缓冲液;

② 加水稀释至1mL

③ 蛋白质溶液。

5. 放置在恒温摇床上,37℃,120rpm2h

6. 13000rpm离心20min沉降后,弃上清,收集离心沉淀;用1mL 50mM MES 缓冲液(或者调节pH8.0左右),同时加入BSA溶液至其终浓度为1%,洗涤3 次;离心沉降后,弃上清。

7. 加入0.97mL MES 缓冲液(或者调节pH8.0左右),将微球浓度调为1%,并重新悬浮;

8. 重新悬浮后加入一定量的BSA溶液(比如终浓度为1%),保存。

9.福林酚法测定偶联蛋白质含量(可选)。(如要测蛋白质含量,则前面的方法中不可加入BSA。)

注意:

微球的偶联与使用的试剂有很大关系,应使用高质量的试剂;此偶联步骤仅用于相应操作指导,对于不同的蛋白质,为了获得更好的偶联效果,需要做相应优化。

 
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