我公司代理销售浙江天科高新技术发展有限公司的乳胶微球，可以提供粒径在60nm~1000nm 之间各种粒径和羧基含量在100μmol/g~1200μmol/g 的乳胶微球。微球的粒径分布指数均小于0.050。微球材质为聚苯乙烯或者聚甲基丙烯酸甲酯。也可以提供氨基的和表面无基团的乳胶微球。并会提供优质的售后服务和产品质量保证。

订购咨询热线：010-5701 7625/8690/8691，136 4103 4192。

产品优势：

• 多样化：可提供60nm~1000nm 之间各种粒径的微球；

• 良好的稳定性：产品批内、批间稳定，并且常温放置可达36 个月；

• 高度的均一性：PDI＜0.050；

• 表面羧基含量高：羧基含量在100μmol/g~ 1200μmol/g；

• 独特的制备工艺：羧基牢固，不易脱落；

• 产品中无聚丙烯酸类含羧基的游离聚合物存在；

• 微球的强度和韧性佳：在应用中不易被机械损坏；

产品描述：

此乳胶微球材质为聚苯乙烯高聚物。产品为水分散体系，有很好的耐溶剂、耐各种pH环境，以及表面富含羧基，可以适用于各种缓冲溶液。微球表面光滑、平整，比表面积大，并具有很好的均一性、单分散性和稳定性。

试剂准备：

MES缓冲液 500mM，pH5-6，4℃储存；

EDAC（1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亚胺盐酸盐） 配置浓度为52μmol/mL（称取10mg EDAC，加入1mL去离子水）；

NHS（N－羟基琥珀酰亚胺） 50mg/mL水溶液；

蛋白质溶液 蛋白质充分稀释溶解，浓度为1－10mg/mL。

一步法偶联：

1. 将配好的溶液按以下顺序加入离心管中，放置在恒温摇床上，37℃，120rpm，15min。

① 加入50μL 500mM 储存缓冲液，再加水稀释至1mL；

② 蛋白质溶液；

③ 200μL 5％微球。

2. 根据计算量量取EDAC 溶液，快速倒入上述溶液中，混匀；

3. 放置在恒温摇床上，37℃，120rpm，1h；

4. 13000rpm离心30min，沉降后，弃上清，收集离心沉淀；用50mM MES 缓冲液洗涤3 次；离心沉降后，弃上清；

5. 加入0.97mL MES 缓冲液，将微球浓度调为1％，并重新悬浮；

6. 福林酚法测定偶联蛋白质含量（可选）。

7．重新悬浮后加入一定量的BSA溶液，保存。

二步法偶联：

1. 将配好的溶液按以下顺序滴加入离心管

① 100μL 500mM MES 缓冲液；

② 加水稀释至1mL；

③ 200μL 5％微球；

④ 230uL NHS 溶液

⑤ EDAC 水溶液（计算量）

2. 放置在恒温摇床上，37℃，120rpm，30min；

3. 13000rpm离心30min，沉降后，弃上清，收集离心沉淀；用1mL 50mM MES 缓冲液洗涤2 次；离心沉降后，弃上清。

4. 将配好的溶液按以下顺序加入离心管中，混匀

① 100ul 500mM MES 缓冲液；

② 加水稀释至1mL；

③ 蛋白质溶液。

5. 放置在恒温摇床上，37℃，120rpm，2h；

6. 13000rpm离心20min沉降后，弃上清，收集离心沉淀；用1mL 50mM MES 缓冲液（或者调节pH至8.0左右），同时加入BSA溶液至其终浓度为1%，洗涤3 次；离心沉降后，弃上清。

7. 加入0.97mL MES 缓冲液（或者调节pH至8.0左右），将微球浓度调为1％，并重新悬浮；

8. 重新悬浮后加入一定量的BSA溶液（比如终浓度为1%），保存。

9．福林酚法测定偶联蛋白质含量（可选）。（如要测蛋白质含量，则前面的方法中不可加入BSA。）

注意：

微球的偶联与使用的试剂有很大关系，应使用高质量的试剂；此偶联步骤仅用于相应操作指导，对于不同的蛋白质，为了获得更好的偶联效果，需要做相应优化。