Cygnus technologies, Inc.（赛纳斯科技公司）是一家专为基因工程药厂、研发部门及检测部门提供宿主细胞蛋白残留检测和生物工艺污染物检测产品的世界著名厂家。生物制品生产过程中存在许多影响产品质量的残留物，诸如特殊重组表达系统中宿主细胞蛋白（Host Cell Protein, HCP）的残留以及生物制品加工过程中培养物残留的污染物。塞纳斯公司提供了广泛而灵敏度极高的一系列用于检测生物工程残留物的产品，在寻求最佳纯化效果和日常质量控制过程中使用塞纳斯的产品可以方便地得到理想的实验结果。

Cygnus F500 Vero Cell ELISA Kit Vero

细胞宿主蛋白免疫检测试剂盒

英文名称： Vero Cell HCP ELISA kit

中国俗称： vero细胞宿主蛋白免疫检测试剂盒

规格型号： 96T/盒

保存温度：2～8℃

Vero Cell HCP ELISA产品介绍：

病毒疫苗或其它治疗用蛋白在Vero细胞中表达是商业用大量生产药物原料产品的经济简便方法。Vero Cell HCP ELISA试剂盒开发使用了不同终端产品和中试样品，４种不同疫苗产品是从疫苗生产商获得，包括全病毒疫苗和重组蛋白。Vero Cell HCP ELISA使用具有广泛反应性，强吸附性的多克隆抗体，可以鉴定出所有Vero细胞系中高度保守的HCP。产品灵敏性强（最低检测浓度达0.7ng/mL）和具有高度特异性，可以应用于任何在Vero细胞中表达的蛋白产物。

检测原理：Vero Cell检测是一个双位点酶联免疫检测。样本中包含的Vero Cell HCPs蛋白与标记有抗- Vero Cell抗体的辣根过氧化物酶同时反应，反应发生在之前涂有一层吸附性抗- Vero Cell蛋白抗体的微量滴定板中进行。免疫反构成为夹层式结构：固相抗休-HCP-酶标记抗体。反应结束后清洗微量滴定板去除未结合反应物。添加TMB作用底物反应。微量滴定板读数器上测定水解物浓度，水解物浓度与Vero Cell HCPs蛋白浓度成比例。用提供的标准液绘制标准曲线，根据读数可以计算出Vero Cell HCPs蛋白含量。

检测过程：取出所有试剂平衡到室温→分别移取50μl标准液，对照物和样品至待测孔→移取100μl anti- Vero Cell:HRP(#F501)至每孔→密封滴定板，摇床室温温育2小时，180rpm→清空小孔，用纸吸干残留液，350μl清洗缓冲液清洗4次→加100μl TMB 作用物(#F005)→室温静置30分钟，不需摇床→加100μl反应终止液(#F006)→分光光度计450/650nm读数

结果分析：标准液(0, 2, 8, 25, 75, 200ng/mL)可用于制作标准曲线，标准液浓度相当于免疫反应HCP总浓度。根据测定的小孔中标准液吸光值绘制标准曲线。数据分析可以使用计算机选配曲线，例如点到点，三次样本函数，或四参数逻辑曲线。不要使用线性回归分析修改样品吸光值，这样会出现显著误差。也可以手工绘图，Y轴标注吸光值，X轴标注浓度。然后根据样品吸光值计算出样品中HCP浓度。（操作时每一浓度标准液都要滴定到两个小孔中，以便计算平均分光光度值，样品也需计算平均吸光值）。

Vero Cell HCP ELISA组成成份：

● Anti- Vero Cell:HRP(辣根过氧化物酶标记)　 1x12mL F501

● Anti- Vero Cell coated微量滴定板　 12x8孔　 F502

● Vero Cell HCP标准液(0, 2, 8, 25, 75, 200ng/mL) 1mL/瓶　 F503

● Stop Solution终止液(0.5N硫磺酸) 　　　 1x12mL　 F006

● TMB (3,3’,5,5’-四甲基联苯氨)　 1x12mL　 F005

● Wash Concentrate清洗物(20倍浓缩)　 1x50mL F004