一．设备： 无菌操作设备。

二．大型设备CO2培养箱：恒温5%、10%CO2维持培养液中pH值。

倒置显微镜：用于每天观察贴壁细胞生长情况。

解剖显微镜，用于准确地取材。

常温冰箱：-4℃，用于保存各种培养液，解剖液和鼠尾胶。

低温冰箱：-20℃--80℃，用于储存血清酶，贵重物品和试剂。

电热干烤箱：用于消毒玻璃器皿。高 压消毒锅：用于消毒培养皿，手术器械。

过滤器：配制解剖液、培养液，必须过滤后才可使用，以去除细菌。

渗透压仪，pH剂，天平等。

三．培养器皿及手术器械

1.培养皿：常用35mm塑料及玻璃皿，解剖取材用15mm-90mm直径。

2.培养板，24-40孔，可用于开放培养。

3.培养瓶；

4.吸管，常用1，5，10ml，均需泡酸、洗涤、灭菌后方可使用。

5.各类培养液贮存器。

6.小型手术器械。

准备：

一.配制培养液

（1）解剖液：以无机盐（去除Ca²⁺, Mg²⁺）加葡萄糖配制成PBS缓冲液，保持一定的渗透压和pH值。

（ 2）基础培养基（MEM）：主要为多种氨基酸，加入葡萄糖，双蒸馏水溶解。

（ 3）接种培养液：用于胰酶消化后的细胞分散，做成细胞悬液，其成分为MEM含1%谷氨酰胺，另加入10%马血清，当天配制。

（4）维持培养液：接种后24h，全部换成此液，后每2周换一次，每次换1/2。其成分为MEM中含5%马血清，1%谷氨酰胺，及适量的支持性营养物质。

二.培养基质 常用鼠尾胶、小牛皮胶，多聚赖氨酸，再涂胶

三.消毒培养皿的备用。所有培养器皿均需清水冲洗2-3d，达两次ddH2O，每遍洗刷3-4次，加塞包装，置于烤箱中干燥消毒，于培养前1天进行。